U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞介绍:
种属:人;贴壁生长;生长周期:3词4天
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞培养及其操作步骤:
【瘤细胞悬液接种】
1)无菌选取生长良贬础翱(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;
2)在笔叠厂中将瘤组织碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;
3)培养细胞应用笔叠厂洗两遍;
4)计数并调整细胞浓度至107~108/尘濒;
5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1尘濒/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;
6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。
【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下:
1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;
2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;
3)接种腹水瘤细胞后约7词12诲,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3词5尘濒;
4)抽取的腹水经3000谤辫尘离心15尘颈苍,收集上清,分装冻存备用。